活動尼龍袋法測定豬養(yǎng)分消化率的研究進展

　摘要：對飼料原料營養(yǎng)價值的準確評定是研究動物營養(yǎng)需要和制定日糧配方的前提和基礎(chǔ)。經(jīng)過反復(fù)改進的活動尼龍袋法具有測定速度快、測定成本低、所需待測樣品量小等優(yōu)點，是一種測定豬飼料原料養(yǎng)分消化率的新方法。此方法最初被應(yīng)用與反芻動物，后被引入單胃動物，經(jīng)反復(fù)修改，已取得良好的效果。本文通過綜述表明，活動尼龍袋法可以應(yīng)用于豬飼料中各原料干物質(zhì)、能量和粗蛋白的表觀消化率。

　　引言

　　對豬飼料原料營養(yǎng)價值的準確評定是豬營養(yǎng)需要量工程中非常重要的部分，目前被廣泛應(yīng)用的主要包括全收糞法和指示劑法(戴?等，2008; 蒙景茂等，2008;Thacker和Qiao，2001;Sauer等，1989)，但是耗時長、成本高，而且工作量過大是這些傳統(tǒng)方法共有的缺點(Yin等，2002;Sauer等，1989)。早在1978年，Petty和Handlos就曾嘗試使用尼龍袋測定豬飼料原料的消化率，1983年Sauer等在他們的基礎(chǔ)上，結(jié)合反芻動物營養(yǎng)學(xué)方法，建立了活動尼龍袋法(Mobile nylon bag technical，MNBT)，它具有測定速度快、測定成本低、所需待測樣品量小等優(yōu)點，而且經(jīng)過十多年的改進，該技術(shù)不斷地被完善，已經(jīng)具有推廣應(yīng)用的價值。

　　1 活動尼龍袋法的基本程序

　　最早將尼龍袋技術(shù)應(yīng)用于測定豬飼料原料消化率數(shù)據(jù)是Petty和Handlos，1978年，他們直接將裝有飼料樣本的尼龍袋從口送入豬的體內(nèi)，直至排出，收集尼龍袋。結(jié)果發(fā)現(xiàn)由于尼龍袋在胃中停留時間過長，所以測定數(shù)據(jù)總是高于傳統(tǒng)法所得數(shù)據(jù)。

　　Sauer等(1983)在他們的基礎(chǔ)上，創(chuàng)建了活動尼龍袋法，并且闡述了自己的操作程序：用網(wǎng)孔孔徑為48 µm的單纖絲尼龍制作成25×40 mm的小尼龍袋，將1 g粉碎粒度為0.8 mm的待測飼料樣品裝入尼龍袋，首先置于盛有500 mL的0.01 N鹽酸和胃蛋白酶溶液的燒杯中，將燒杯于37℃水浴中振蕩2.5 h，溶液pH為2.0，胃蛋白酶含量為377.4 IU/L。然后將尼龍袋從燒杯中取出，通過十二指腸瘺管引入體重為40 kg左右的健康豬體內(nèi)，待尼龍袋通過消化道后從糞中回收尼龍袋，用干紙巾輕輕揩去袋子表面糞便，冷凍干燥，測定袋內(nèi)剩余物質(zhì)中待測養(yǎng)分的含量，計算待測飼料養(yǎng)分消化率。

　　但是，與傳統(tǒng)法相比，用最初的活動尼龍袋技術(shù)所測得的消化率數(shù)值變異較大(Sauer等，1983)。為了找出變異來源，Graham等(1985)和Cherian等(1988，1989)用生長育肥豬做了進一步的研究，表明體外消化的pH、胃蛋白酶濃度和時間以及待測飼料粉碎粒度、尼龍布網(wǎng)孔孔徑及尼龍袋大小對蛋白質(zhì)表觀消化率有顯著影響，其中以飼料粉碎粒度影響最大。Lin等(1995)在比較研究全收集食糜法與MNBT測定飼料粗蛋白質(zhì)(CP)、干物質(zhì)(DM)和氨基酸回腸表觀消化率時則觀察到體外模擬消化條件，包括溶液pH、胃蛋白酶的活性及模擬消化的時間對測定結(jié)果沒有影響。

　　關(guān)于MNBT測定豬飼料養(yǎng)分方法中存在許多爭議，如尼龍袋網(wǎng)孔孔徑太小、飼料樣品顆粒度和體外消化時間等。網(wǎng)孔孔徑的大小直接影響了消化液和袋內(nèi)物質(zhì)的交換，過大低估飼料蛋白質(zhì)和氨基酸的消化率(Sauer和de Lange.1989)，過低則會高估。Graham等(1985)研究表明當(dāng)網(wǎng)孔孔徑為20 m時，部分細菌可以出入尼龍袋。僅幾年又有學(xué)者表示，是否用水洗去尼龍袋上污染的糞便對MNBT方法的準確性具有顯著的影響(Qiao和Thacker，2001)。根據(jù)Qiao和Thacker的最新的研究，經(jīng)過完善的MNBT的測定程序為：首先將1 g粉碎粒度為1.0 mm的飼料原料放入網(wǎng)孔孔徑為48 µm、大小為25×40 mm2的尼龍袋中，四面封口;然后在pH為2.0、胃蛋白酶濃度為377.41 IU/L的溶液中，體外消化4 h，然后通過十二指腸普通T型瘺管引入;最后，通過集糞袋回收尼龍袋，不能用水沖洗，分別測定。譙仕彥等(2002)利用改進的MNBT測定干物質(zhì)、能量和粗蛋白是消化率，與傳統(tǒng)法相比，相關(guān)性分布達到了93%、94%和76%，較未改進的MNBT有明顯的提高。

　　2 活動尼龍袋法測定飼養(yǎng)養(yǎng)分消化率

　　2.1 飼料干物質(zhì)消化率

　　主要思路為總結(jié)所有研究中的結(jié)果，找出相關(guān)性，然后引出改進后尼龍袋法對測定準確度的提高。

　　2.2 活動尼龍袋法測定飼料能量消化率

　　(同前)主要思路為總結(jié)所有研究中的結(jié)果，找出相關(guān)性，然后引出改進后尼龍袋法對測定準確度的提高。

　　2.3 活動尼龍袋法測定飼料粗蛋白消化率

　　(同前)主要思路為總結(jié)所有研究中的結(jié)果，找出相關(guān)性，然后引出改進后尼龍袋法對測定準確度的提高。

　　2.4 活動尼龍袋法測定飼料中其他成分的消化率

　　主要思路為總結(jié)以前的實驗，闡述回直腸吻合與MNBT結(jié)合的不可行性。